Pusa Fa'amatalaga o Suiga o le Gene 29 EGFR o le Tagata (Fluorescence PCR)-RUO
Igoa o le oloa
Pusa Fa'amatalaga o Suiga o le Gene 29 EGFR o le Tagata (Fluorescence PCR)-RUO
Fa'ama'i pipisi
Ua avea le kanesa o le mama ma mafuaʻaga autū o le oti i le lalolagi atoa, ma ua matuā lamatia ai le soifua maloloina o tagata. E tusa ma le 80%-85% o tagata mamaʻi e maua i le kanesa o le mama e lē o ni sela laiti. O le EGFR o le taimi nei o le sini autū mo le togafitia o le kanesa o le mama e lē o ni sela laiti. O le phosphorylation o le EGFR e mafai ona faʻalauiloa ai le tuputupu aʻe o sela o le tumo, le eseesega, le osofaʻiga, le metastasis, le teteʻe i le apoptosis, ma faʻalauiloa ai le angiogenesis o le tumo. E mafai e le EGFR tyrosine kinase inhibitors (TKI) ona poloka le auala faʻailoilo a le EGFR e ala i le taofia o le EGFR autophosphorylation, ma taofia ai le faʻateleina ma le eseesega o sela o le tumo, faʻalauiloa ai le apoptosis o sela o le tumo, faʻaitiitia ai le angiogenesis o le tumo, ma isi mea, ina ia ausia ai le togafitiga faʻatatau i le tumo [1]. O le tele o suʻesuʻega ua faʻaalia ai o le aoga o le togafitiga o le EGFR-TKI e fesoʻotaʻi vavalalata ma le tulaga o le suiga o le kene EGFR, ma e mafai ona taofia faapitoa le tuputupu aʻe o sela o le tumo ma le suiga o le kene EGFR [2,3]. O le kene EGFR o loʻo i luga o le lima pupuu o le chromosome 7 (7p12), ma le umi atoa o le 200Kb ma e aofia ai le 28 exons. O le vaega o le fesuia'iga o siama e tele lava ina i totonu o exons 18 i le 21, o codons 746 i le 753 o le fesuia'iga o siama i le exon 19 e tusa ma le 45% ma o le fesuia'iga o siama L858R i le exon 21 e tusa ma le 40% i le 45% [4]. O lo'o fa'ailoa manino mai e le NCCN Guidelines for the Diagnosis and Treatment of Non-Small Cell Lung Cancer e mana'omia le su'eina o le fesuia'iga o siama EGFR a'o le'i tu'uina atu le EGFR-TKI. O lenei pusa su'ega e fa'aaogaina e ta'ita'ia ai le tu'uina atu o vaila'au epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor (EGFR-TKI), ma tu'uina atu ai le fa'avae mo vaila'au fa'apitoa mo gasegase e maua i le kanesa o le mama e le o ni sela la'ititi. O lenei pusa e na'o le fa'aaogaina mo le iloa o fesuia'iga masani i le gene EGFR i gasegase e maua i le kanesa o le mama e le o ni sela la'ititi. O taunu'uga o su'ega e mo na'o le fa'asinomaga fa'aklinikal ma e le tatau ona fa'aaogaina o le na'o le fa'avae mo togafitiga fa'apitoa o gasegase. E tatau i foma'i ona mafaufau i le tulaga o le gasegase, fa'ailoga o vaila'au, ma togafitiga. O le tali atu ma isi fa'ailoga o su'ega i le fale su'esu'e ma isi mea e fa'aaogaina e fa'amasino atoatoa ai taunu'uga o su'ega.
Alavai
| Tali Fa'aputu | Alavai |
| EGFR IC Reaction Buffer | Auala FAM |
| L858R Tali Fa'amama | Auala FAM |
| 19del Tali Fa'aputu | Auala FAM |
| T790M Tali Fa'amama | Auala FAM |
| G719X Tali Fa'amama | Auala FAM |
| 3Ins20 Tali Fa'amama | Auala FAM |
| L861Q Tali Fa'amama | Auala FAM |
| Fa'aputuga Tali S768I | Auala FAM |
Fa'atulagaga Fa'apitoa
| Teuina | Suavai: ≤ -18 ℃ I le pogisa |
| Aso e teu ai | 12 masina |
| Ituaiga Fa'ata'ita'iga | aano fou o le tumo, vaega fa'ama'i ua fa'a'aisa, aano po'o vaega fa'ama'i ua fa'apipi'i i le paraffin, plasma po'o le serum |
| CV | <5.0% |
| LoD | iloa o le fofo o le tali atu o le nucleic acid i lalo o le talaaga o le 3ng/μL ituaiga vao, e mafai ona iloa ma le mautu le fua faatatau o le fesuiaʻiga o le 1%; b) tali atu o le nucleic acid I lalo o le fua faatatau o le mutation 1%, e mafai ona iloa ma le mautu le mutation 1×103Copies/mL i le talaaga o le wild-type o le 1×105Copies/mL; c) E mafai e le fofo fa'asinomaga i totonu ona iloa le oloa fa'asinomaga SW3 ma le tapula'a maualalo o le iloa o le fa'asinomaga i totonu o le pisinisi. A iloa e le pusa le mea fa'asinomaga o le tapula'a o le iloa o le atunu'u, e mafai ona iloa ma le mautu le tapula'a o le iloa o le 2.5% o le fesuia'iga o le taimi ma le fesuia'iga o le EGFR gene amplification ma le numera kopi o le 4. |
| Fa'apitoa | E leai se tali atu i le fesootaʻiga ma le DNA genomic o le tagata ituaiga masani ma isi ituaiga mutant. |
| Meafaigaluega Fa'aoga | Fa'aogaina o Biosystems 7500 Faiga PCR Taimi Moni, Fa'aogaina o Biosystems 7300 Faiga PCR Taimi Moni, QuantStudio® 5 Faiga PCR Taimi Moni, Faiga PCR Taimi Moni a le LightCycler® 480, BioRad CFX96 Polokalame PCR i le Taimi Moni. |
Tafega o Galuega
Mea e manaʻomia mo vailaʻau faʻamaʻi ae leʻi tuʻuina atu:Vai e leai se vai o le DNase/RNase, ethanol e leai se vai. A fa'ata'ita'iina se fa'ata'ita'iga o le aano ua fa'apipi'iina i le paraffin, e fautuaina e fa'aaoga le QIAamp DNA FFPE Tissue Kit (56404) mai le QIAGEN ma le Paraffin-embedded Tissue DNA Rapid Extraction Kit (DP330) mai le Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.. A fa'ata'ita'iina le fa'ata'ita'iga o le plasma/serum, e fautuaina e fa'aaoga le Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (lea e mafai ona fa'aaogaina fa'atasi ma le Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) mai le Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. po'o le QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit (55114) mai le QIAGEN.
Mea fa'aaogā e mana'omia ae le'i tu'uina atu: DNase/RNase Free Tips, totigilima e lafoa'i, paipa DNase/RNase Free Centrifuge, fasi paipa e 8 mo le PCR, centrifuge.








